TSU-68 (SU6668, Orantinib) 252916-29-3

.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 310,35 TSU-68 (SU6668, Orantinib) tem maior potência contra a autofosforilação PDGFR com Ki de 8 nM, mas também inibe fortemente a transfosforilação de Flk-1 e FGFR1, pouco atividade contra IGF-1R, Met, Src, Lck, Zap70, Abl e CDK2; não inibe EGFR. Fase 3. \ n Atividade biológica TSU-68 é um inibidor competitivo, no que diz respeito ao ATP, para a trans-fosforilação Flk-1 / KDR, a trans-fosforilação de FGFR1 e a autofosforilação de cinases PDGFRβ. TSU-68 (0,03-10 μM) inibe a fosforilação da tirosina de KDR em HUVECs estimulados por VEGF. TSU-68 também inibe a fosforilação de tirosina PDGFRβ estimulada por PDGF em células NIH-3T3 que superexpressam PDGFRβ a uma concentração mínima de 0,03-0,1 μM. TSU-68 inibe a fosforilação induzida por FGF ácida do substrato FGFR1 2 a 10 μM e superior. No entanto, TSU-68 (até 100 μM) não tem efeito sobre a fosforilação de tirosina EGFR estimulada por EGF em células NIH-3T3 com superexpressão de EGFR. TSU-68 inibe a mitogênese de HUVECs conduzida por VEGF e FGF com IC50 médio de 0,34 μM e 9,6 μM, respectivamente. Em células de leucemia mieloide humana MO7E, TSU-68 inibe a autofosforilação de tirosina do receptor de fator de células-tronco (SCF), c-kit, com IC50 de 0,1-1 μM, bem como fosforilação ERK1 / 2, um evento de sinalização a jusante de c- ativação do kit. TSU-68 também inibe a proliferação induzida por SCF de células MO7E com IC50 de 0,29 μM e induz a apoptose. TSU-68 (75-200 mg / kg) induz a inibição do crescimento tumoral contra uma ampla gama de tipos de tumor em modelos de xenoenxerto em camundongos atímicos, incluindo células A375, Colo205, H460, Calu-6, C6, SF763T e SKOV3TP5. TSU-68 (75 mg / kg) também suprime a angiogênese tumoral de xenoenxertos de glioma C6. Em um modelo de tumor de carcinoma de cólon humano HT29, TSU-68 (200 mg / kg) diminui a permeabilidade média dos vasos e o volume fracionário médio do plasma na borda e no núcleo do tumor. TSU-68 promove o desenvolvimento estromal anormal na periferia dos carcinomas. Em um modelo de tumor de fígado VX2 de coelho, TSU-68 (200 mg / kg) aumenta o efeito da infusão quimioterápica. \ n Reações de trans-fosforilação Os ensaios de tirosina quinase para quantificar a atividade de trans-fosforilação de Flk-1 e FGFR1 são realizados em placas de microtitulação de 96 poços pré-revestidos (20 μg / poço em PBS; incubados durante a noite a 4 ° C) com o substrato de peptídeo poli-Glu, Tyr (4: 1). Excesso de sítios de ligação de proteína são bloqueados com BSA de 1-5% (p / v) em PBS. As proteínas de fusão GST-FGFR1 (domínio quinase) ou GST-Flk-1 (domínio citoplasmático) purificadas são então adicionadas aos poços de microtitulação em tampão de diluição de quinase de concentração 2 × consistindo em HEPES 100 mM, NaCl 50 mM, NaVO4 40 μM e 0,02 % (w / v) BSA. A concentração final da enzima para GST-Flk-1 e GST-FGFR1 é 50 ng / mL. SU6668 é dissolvido em DMSO a 100 × a concentração final necessária e diluído 1:25 em H2O. Vinte e cinco μL de SU6668 diluído são subsequentemente adicionados a cada poço de reação. A reação da quinase é iniciada pela adição de diferentes concentrações de ATP em uma solução de MnCl2, de modo que as concentrações finais de ATP abrangem o Km para a enzima, e a concentração final de MnCl2 é de 10 mM. As placas são incubadas durante 5-15 min à temperatura ambiente antes de parar a reação com a adição de EDTA. As placas são então lavadas três vezes com TBST. Os anti-soros antifosfotirosina policlonais de coelho são adicionados aos poços a uma diluição de 1: 10000 em TBST contendo 0,5% (p / v) de BSA, 0,025% (p / v) de leite em pó desnatado e 100 μM NaVO4 e incubados por 1 hora a 37 ° C. As placas são então lavadas três vezes com TBST, seguido pela adição de anti-soros de cabra anti-coelho conjugados com HRP. As placas são incubadas durante 1 hora a 37 ° C e depois lavadas três vezes com TBST. A quantidade de fosfotirosina em cada poço é quantificada após a adição de 2,2 Método \ n As células são semeadas (3 × 105 células / poço de 35 mm) em DMEM contendo 10% (v / v) de FBS e crescem até a confluência e então quiesce em DMEM contendo 0,1% de soro por 2 horas antes do tratamento medicamentoso. HUVECs (semeadas em 2 x 106 células / placa de 10 cm) são cultivadas até a confluência em meio de crescimento de células endoteliais e, em seguida, quiescidas em meio basal de células endoteliais contendo 0,5% de FBS por 24 horas antes do tratamento com drogas. Todas as linhas de células são incubadas com SU6668 por 1 hora antes da estimulação do ligante (100 ng / mL) por 10 min. Western blotting é bom \ n

Grupo de Produto : Proteína Tirosina Quinase > Inibidor VEGFR