Peso molecular: 519,28 H 89 2HCl é um potente inibidor de PKA com Ki de 48 nM, 10 vezes seletivo para PKA do que PKG, seletividade superior a 500 vezes do que PKC, MLCK, calmodulina quinase II e caseína quinase I / II. \ N Atividade biológica H89 2HCl é um potente inibidor da proteína quinase A PKA (dependente de cAMP) com Ki de 48 nM, exibe seletividade 10 vezes sobre PKG, exibe seletividade> 500 vezes sobre PKC, MLCK, calmodulina quinase II e caseína quinase I / II. O pré-tratamento das células com H-89 (30 μM) 1 h antes da adição de forscolina inibe marcadamente a fosforilação da proteína induzida por forscolina de uma maneira dependente da dose. H89 também inibe várias outras quinases com IC50 de 80, 120, 135, 270, 2600 e 2800 nM para S6K1, MSK1, PKA, ROCKII, PKBα e MAPKAP-K1b, respectivamente. H89 também tem atividade em alguns receptores celulares e canais iônicos, incluindo canais Kv1.3 K +, β1AR e β2AR. H89 causa modificações distintas de fosforilação de proteínas, com as mudanças mais robustas na fosforilação são frutose-1,6-bifosfatase, ribonucleoproteína nuclear heterogênea (hnRNP), cofator NSFL1 p47, todos os quais têm conexões potencialmente regulatórias para cAMP / PKA. Ensaio de cinase de protocolo (apenas para referência): [1]
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PKA enzyme activity
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cAMP-dependent protein kinase activity is assayed in a reaction mixture containing, in a final volume of 0.2 mL, 50 mM Tris-HC1 (pH 7.0), 10 mM magnesium acetate, 2 mM EGTA, 1 μM cAMP or absence of cAMP, 3.3-20 μM [γ-32P]ATP (4 × 105 cpm), 0.5 μg of the enzyme, 100 μg of histone H2B, and each compound, as indicated.
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Ensaio de células: [1]
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Cell lines
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PC12D
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Concentrations
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~30 μM
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Incubation Time
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1 h
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Method
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Levels of intracellular cAMP are determined. After 48 h in culture, PC12D cells are cultured in test medium containing 30 μM H-89 for 1 h and then exposed to fresh medium that contained both 10 μM forskolin and 30 μM H-89. Cells are scraped off with a rubber policeman and sonicated in the presence of 0.5 ml of 6% trichloroacetic acid. To extract trichloroacetic acid, 2 ml of petroleum ether is added, the preparation mixed and centrifuged at 3000 rpm for 10 min. After aspiration of the upper layer, the residue sample solution is used for determination.
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Estudo Animal: [5] [6]
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Animal Models
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rat; mice
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Formulation
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Dissolved in 100% DMSO, diluted 1:20 in 0.9% sterile saline (Rat); 1% DMSO (Mice)
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Dosages
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20 or 200 mg/kg (Rat); 0-5 mg/kg (Mice)
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Administration
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s.c. (Rat); i.p. (Mice)
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Solubility
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1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80,
30 mg/mL
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* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Conversão de diferentes modelos de animais com base em BSA (valor com base em dados das diretrizes preliminares da FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por exemplo, para modificar a dose de resveratrol usada para um camundongo (22,4 mg / kg) para uma dose baseada na BSA para um rato, multiplique 22,4 mg / kg pelo fator Km para um camundongo e, em seguida, divida pelo fator Km para um rato. Este cálculo resulta em uma dose equivalente de rato para o resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Informação Química
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Molecular Weight (MW)
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519.28
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Formula
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C20H20BrN3O2S.2HCl
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CAS No.
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130964-39-5
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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104 mg/mL
(200.27 mM)
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Water
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6 mg/mL
(11.55 mM)
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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In vivo
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1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80
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30 mg/mL
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Chemical Name
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(E)-N-(2-(4-bromocinnamylamino)ethyl)isoquinoline-5-sulfonamide dihydrochloride
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Calculadora de molaridade Calculadora de diluição Calculadora de peso molecular
Grupo de Produto : Outros > Inibidor PKA
