AZ 960 905586-69-8

.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Atividade biológica AZ960 também inibe muitas quinases menos de 50% a uma concentração de 0,1 μM, como JAK3 (IC50 = 9 nM), TrkA, Aurora e ARK5. Nas células, AZ 960 inibe a fosforilação de STAT5 em células TEL-JAK2 com um IC50 médio de 15 nM e exibe sensibilidade de 15-30 vezes para a fosforilação de STAT5 conduzida por TEL-JAK2 em comparação com linhas celulares conduzidas por outros membros da família de quinase JAK ( TEL-JAK1, -JAK3 e -TYK2). AZ 960 mostra atividade potente na inibição da proliferação das linhas celulares TEL-JAK2, -JAK1, -JAK3 e -Tyk2 com valores de GI50 de 25 nM, 230 nM, 279 nM e 214 nM, respectivamente. Além disso, AZ 960 também inibe potentemente a proliferação de células SET-2 com um GI50 médio de 33 nM, reduzindo os níveis de fosforilação de STAT3 e STAT5. AZ 960 causa parada de crescimento e apoptose de vírus linfotrópico de células T humanas tipo 1, HTLV-1pe 1, HTLV-1LV-1ose de proliferação de células T-cSET-2 humanas com Bcl-xL por pequenos interferentes de RNA potencia os efeitos antiproliferativos de AZ 960 em células MT-1. Um estudo recente mostra que o AZ 960 leva à inibição significativa do crescimento clonogênico e à indução da apoptose de células AML recém-isoladas de pacientes. \ n Ensaio bioquímico enzimático e estudos de inibição de perfil de quinase de AZ 960 são realizados usando uma quinase JAK2 recombinante (aminoácidos 808-1132) em uma concentração de peptídeo (peptídeo Tyk2) de 100 nM e uma concentração de ATP de 15 μM. São usadas concentrações de AZ 960 variando de 0,003 μM a 30 μM. O modo de inibição e a constante de inibição (Ki) de AZ960 contra JAK2 quinase são avaliados adicionalmente por cinética de inibição. Especificamente, uma série de reações catalisadas por JAK2 são configuradas em tampão HEPES (75 mM, pH 7,3) com uma concentração fixa de peptídeo (FL-Ahx-IPTSPITTTYFFFKKK-COOH) e concentrações variadas de ATP e AZ 960. O progresso de cada reação é subsequentemente monitorada pelo sistema Caliper LC3000, e a velocidade inicial de cada reação é extraída do curso de tempo de reação correspondente. Para definir o modo de inibição, as velocidades iniciais são plotadas contra as concentrações de ATP correspondentes usando gráficos de Lineweaver-Burk e a convergência característica das linhas no eixo y demonstra a competitividade de AZ 960 para ATP. A inspeção inicial de Ki usando a equação de Michealis-Menten revelou que AZ960 é um inibidor de ligação forte de JAK2. AZ960 é perfilado contra 83 quinases em três concentrações de inibidor (0,01 μM, 0,10 μM e 1,0 μM). Método A proliferação celular é avaliada usando o ensaio fluorométrico / colorimétrico BIOSOURCE AlamarBlue e lida no leitor de microplacas Spectra Max Gemini EM. As células SET-2 são semeadas a 20.000 células / poço, células TEL-JAK2 Ba / F3 a 2.000 células / poço e todos os outros TEL-JAKs a 5000 células / poço em placas de 96 poços. As células são tratadas com AZ 960 24 horas após o plaqueamento e cultivadas por 72 horas para SET-2 e 48 horas para células TEL-JAK Ba / F3. Após o período de crescimento indicado, Alamar Blue (10 μL / poço) é adicionado, as células são incubadas a 37 ° C em 5% de CO2 por 2 horas e a fluorescência é medida a 545 (excitação) e 600 nm (emissão). Os dados são normalizados para porcentagem do controle e os valores de GI50 (a concentração que causa 50% de inibição do crescimento) são calculados usando o Xlfit4 versão 4.2.2 para Microsoft Excel.

Grupo de Produto : Epigenética > Inibidor JAK