AG-490 (Tyrphostin B42) 133550-30-8

.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 294.30 AG-490 (Tyrphostin B42) é um inibidor de EGFR com IC50 de 0,1 μM, 135 vezes mais seletivo para EGFR versus ErbB2, também inibe JAK2 sem atividade para Lck, Lyn, Btk, Syk e Src. \ n A atividade biológica AG-490 inibe a proliferação celular conduzida por HER-2 com IC50 de 3,5 μM. Correspondendo à inibição dependente da dose específica de JAK2 constitutivamente ativada em células de leucemia aguda pré-B (LLA), AG-490 (5 μM) bloqueia quase completamente o crescimento de todas as células LLA induzindo morte celular programada, sem efeito deletério sobre hematopoiese normal. AG-490 não inibe as atividades de Lck, Lyn, Btk, Syk e Src. AG-490 (60-100 μM) bloqueia a ativação constitutiva de Stat3sm e inibe o crescimento espontâneo e induzido por interleucina 2 de células tumorais micose fungóide (MF) com valores de IC50 de 75 μM e 20 μM, respectivamente. AG-490 inibe potentemente o crescimento de células T humanas mediadas por IL-2 com um IC50 de 25 μM, bloqueando as atividades de JAK3 e STAT5a / b. Embora AG-490 sozinho não tenha efeito sobre a proliferação de células FDrv210H a uma concentração de 5 μM, AG-490 pode sinergizar com STI571 para aumentar seu efeito inibitório na proliferação conduzida por p210bcr-abl. AG-490 inibe significativamente a ativação constitutiva de Stat3 em células MOPC, MPC11 e S194, levando a uma dramática apoptose dose-dependente. AG-490 (100 μM) inibe a fosforilação de Akt, inibe a ativação do fator nuclear-κB e causa a ativação de GSK-3β, levando à redução de c-Myc. AG-490 (50 μM) pode induzir a apoptose de células BaF3 resistentes a imatinibe que expressam mutantes T315I e E255K de Bcr-Abl. AG-490 a 30 μM inibe não apenas a fosforilação induzida por Epo de JAK2 de tipo selvagem, mas também a fosforilação constitutiva do mutante JAK2 V617F. AG-490 também inibe potentemente o crescimento de células independentes de citocinas induzido pelo mutante JAK2 V617F em células BaF3. A administração de AG-490 reduz drasticamente o número de células CD45 + e HLA-DR + de 48% e 46% na medula óssea de camundongos não tratados, bem como 38% e 22% no baço de camundongos não tratados para níveis indetectais. A administração in vivo de AG-490 causa apoptose de células tumorais de mieloma murino, mas não inibe a ativação de macrófagos mediada por IL-12 e a produção de IFN-γ pelos linfócitos. Consistente com o bloqueio in vitro da atividade mutante JAK2 V617F, o tratamento com AG-490 a 0,5 mg / dia por 10 dias inibe efetivamente a tumorigênese induzida por mutante JAK2 V617F e a invasão de células tumorais em camundongos nus. A terapia combinada com AG-490 e IL-12 induz maiores efeitos antitumorais do que qualquer agente sozinho em um modelo de tumor de mieloma murino. \ n A autofosforilação de quinase in vitro AG-490 é dissolvida em DMSO 10% -H2O-etanol 45%. Extratos brutos de membrana (0,125 μg / mL) são pré-ativados com EGF (20 nM) em tampão HEPES 50 mM, pH 7,6 e NaCl 125 mM, por 15 minutos a 4 ° C. A atividade de autofosforilação de EGFR ou ErbB2 quinase é testada a 4 ° C por 30 segundos em placas de 96 poços em forma de V. Extratos de membrana (8 μL) são adicionados a cada poço contendo mistura de reação (12 μL, 50mM, HEPES, pH 7,4,125 mM NaCl, 12 mM M8Ac2, 2 mM MnCl2, 1 mM NaVO3, 1 μM ATP e 1 μCi [γ -32P] ATP, concentrações finais) e concentrações crescentes de AG-490 (4 μL). Após terminação por adição de tampão de amostra quente, as amostras são corridas num minigel de electroforese em gel de SDS-poliacrilamida a 6%, os géis são secos e a autorradiografia é efectuada durante o período de exposição linear. As bandas receptoras são escaneadas densitrometricamente e os resultados analisados ​​pelo programa Ez-Fit. Para a análise de autofosforilação de JAK2, JAK2 é imunoprecipitado usando anticorpo anti-JAK2 de lisados ​​de células G2 pré-tratadas por 16 horas com concentrações crescentes de AG-490 (0-50 μM). Os imunocomplexos são então imunotransferidos com anticorpo anti-fosfotirosina. Uma inibição dependente da dose da atividade da quinase in vitro é demonstrada pela avaliação da autofosforilação de JAK2. Método \ n As células são expostas a diferentes concentrações de AG-490 por 16 horas. Para a determinação da proliferação celular, [3H] timidina (1 μCi) é adicionada 6 horas ou mais antes que as culturas sejam encerradas. As células são então coletadas e as amostras contadas em um contador de cintilação líquida. \ n

Grupo de Produto : Proteína Tirosina Quinase > Inibidor EGFR