OSI-420 183320-51-6

.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 415,87 OSI-420 é o metabólito ativo de Erlotinibe (inibidor de EGFR com IC50 de 2 nM). \ n Atividade Biológica OSI-420 é o principal metabólito de Erlotinibe em humanos plasma. O desaparecimento do erlotinibe do plasma após uma curta infusão IV é biexponencial com uma meia-vida terminal média de 5,2 he uma depuração média de 128 ml / min por m (2). A exposição do OSI-420 (AUC) no plasma é 30% (intervalo 12-59%) do erlotinibe, e a depuração do OSI-420 é mais de 5 vezes maior do que o erlotinibe. Erlotinib e OSI-420 são equipotentes e as concentrações combinadas de erlotinib + OSI-420 alcançadas no CSF ​​excederam o IC50 (7,9 ng / ml ou 20 nM) para a inibição da tirosina quinase EGFR em células tumorais intactas. O erlotinib inibe potentemente a ativação de EGFR em células intactas, incluindo células tumorais de cabeça e pescoço humanas HNS (IC50 20nM), células de câncer de cólon humano DiFi e células de câncer de mama humano MB-468 MDA. Erlotinibe (1 μM) induz apoptose em células de câncer de cólon humano DiFi. Crescimento de erlotinibe de um painel de linhas celulares NSCLC, incluindo A549, H322, H3255, H358 H661, H1650, H1975, H1299, H596 com IC50 variando de 29 nM a> 20 μM. Erlotinib (2 μM) inibe significativamente o crescimento de células pancreáticas AsPC-1 e BxPC-3. Os efeitos do Erlotinib HCl em combinação com a gencitabina são considerados aditivos nas células cancerosas pancreáticas com mutação KRAS. Dez micromolar de Erlotinib inibe a fosfo-rilação de EGFR nos locais Y845 (fosforilação dependente de Src) e Y1068 (auto-fosforilação). A combinação com Erlotinib pode diminuir a atividade da Akt estimulada pela rapamicina e produzir um efeito sinérgico na inibição do crescimento celular. Em doses de 100 mg / kg, Erlotinib previne completamente a autofosforilação induzida por EGF de EGFR em tumores HN5 humanos que crescem como xenoenxertos em camundongos atímicos e do EGFR hepático dos camundongos tratados. O erlotinib reduz o crescimento de células AML humanas xenoenxertadas. \ n Ensaios de cinase As placas de 96 poços são revestidas por incubação durante a noite a 37 ° C com 100 μL por poço de 0,25 mg / mL de PGT em PBS. O excesso de PGT é removido por aspiração e a placa é lavada 3 vezes com tampão de lavagem (0,1% Tween 20 em PBS). A reação da quinase é realizada em 50 μL de HEPES 50 mM (pH 7,3), contendo cloreto de sódio 125 mM, cloreto de magnésio 24 mM, ortovanadato de sódio 0,1 mM, ATP 20 μM, EGF 1,6 μg / mL e 15 ng de EGFR, afinidade purificado a partir de membranas celulares A431. É adicionado erlotinib HCl em DMSO para dar uma concentração final de DMSO de 2,5%. A fosforilação é iniciada pela adição de ATP e prossegue por 8 minutos à temperatura ambiente, com agitação constante. A reação da quinase é terminada por aspiração da mistura de reação e é lavada 4 vezes com tampão de lavagem. A PGT fosforilada é medida por 25 minutos de incubação com 50 μL por poço de anticorpo antifosfotirosina PY54 conjugado com HRP, diluído para 0,2 μg / mL em tampão de bloqueio (3% BSA e 0,05% Tween 20 em PBS). O anticorpo é removido por aspiração e a placa é lavada 4 vezes com tampão de lavagem. O sinal colonmétrico é desenvolvido pela adição de substrato de peroxidase de micropoços TMB, 50 μL por poço, e interrompido pela adição de ácido sulfúrico 0,09 M, 50 μL por poço. A fosfotirosina é estimada por medição da absorbância a 450 nm. O sinal para controles é tipicamente 0,6-1,2 unidades de absorvância, essencialmente sem fundo em poços sem AlP, EGFR ou PGT e é proporcional ao tempo de incubação por 10 minutos. Método Células em crescimento exponencial são semeadas em placas de plástico de 96 poços e expostas a diluições em série de erlotinibe, pemetrexedo ou a combinação em uma proporção de concentração constante de 4: 1 em triplicados por 72 h. A viabilidade celular é avaliada por contagem de células e pelo ensaio de brometo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazólio. A inibição do crescimento é expressa como a porcentagem de células sobreviventes em células de controle tratadas com fármaco versus células de controle tratadas com PBS (o que é considerado como 100% de viabilidade). O valor IC50 é a concentração que resulta em 50% de inibição do crescimento celular por uma exposição de 72 horas à (s) droga (s) em comparação com células de controle não tratadas e é calculado pelo software CalcuSyn.

Grupo de Produto : Proteína Tirosina Quinase > Inibidor EGFR