.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 507,59 JNK-IN-8 é o primeiro inibidor JNK irreversível para JNK1, JNK2 e JNK4 com IC50 de 4,7 nM, 18,7 nM e 1 nM, seletividade> 10 vezes contra MNK2, Fms e nenhuma inibição para c-Kit, Met, PDGFRβ. \ n Atividade biológica JNK-IN-8 inibe a fosforilação de c-Jun em células HeLa e A375 com EC50 de 486 nM e 338 nM, respectivamente. JNK-IN-8 mostra uma melhoria dramática na seletividade e na ligação eliminada a IRAK1, PIK3C3, PIP4K2C e PIP5K3. JNK-IN-8 requer Cys116 para inibição de JNK2. JNK-IN-8 (10 mM) suprime a fosforilação estimulada por IL-1β de c-Jun em células IL-1R, um substrato estabelecido dos JNKs. O JNK-IN-8 se liga covalentemente às isoformas JNK causou um pequeno retardo na mobilidade eletroforética das isoformas JNK. Descobriu-se que JNK-IN-8 inibe a JNK quinase por perfil de seletividade de quinase de base ampla de uma biblioteca de inibidores de acrilamida quinase com base na estrutura de imatinibe usando a abordagem KinomeScan. JNK-IN-8 possui uma regioquímica distinta das subestruturas de ácido 1,4-dianilina e 1,3-aminobenzóico em relação ao imatinibe e usa uma ogiva de acetamida N, N-dimetil butenóica para covalentemente atingir Cys154. JNK-IN-8 adota uma conformação de ligação tipo I em forma de L para acessar Cys 154 localizado em direção à borda do sítio de ligação de ATP. Ensaio de cinase de protocolo (apenas para referência): [1]
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Binding Kinetics Assay
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Binding kinetics assay A375 cells are pretreated with 1 μM JNK-IN-8 for the indicated amounts of time. Remove the medium and wash three times with PBS. Resuspend the cell pellet with 1 mL Lysis Buffer (1% NP-40, 1% CHAPS, 25 mM Tris, 150 mM NaCl, Phosphatase Inhibitor Cocktail, and Protease Inhibitor Cocktail). Rotate end to end for 30 min at 4℃. Lysates are cleared by centrifugation at 1.4×104 rpm for 15 min in the Eppendorf. The cleared lysates are gel filtered into Kinase Buffer (0.1% NP-40, 20 mM HEPES, 150 mM NaCl, Phosphatase Inhibitor Cocktail, Protease Inhibitor Cocktail) using 10DG columns. The total protein concentration of the gel-filtered lysate should be around 5–15 mg/ml. Cell lysate is labeled with the probe from ActivX at 5 μM for 1 hour. Samples are reduced with DTT, and cysteines are blocked with iodoacetamide and gel filtered to remove excess reagents and exchange the buffer. Add 1 vol of 2× Binding Buffer (2% Triton-100, 1% NP-40, 2 mM EDTA, 2× PBS) and 50 μL streptavidin bead slurry, and rotate end to end for 2 hours, centrifuge at 7,000 rpm for 2 min. Wash three times with 1× Binding Buffer and three times with PBS. Add 30 μL 1× sample buffer to beads; heat samples at 95℃ for 10 min. Run samples on an SDS-PAGE gel at 110V. After transferred, the membrane is immunoblotted with JNK antibody.
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Conversão de diferentes modelos de animais com base em BSA (valor com base em dados das diretrizes preliminares da FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por exemplo, para modificar a dose de resveratrol usada para um camundongo (22,4 mg / kg) para uma dose baseada na BSA para um rato, multiplique 22,4 mg / kg pelo fator Km para um camundongo e, em seguida, divida pelo fator Km para um rato. Este cálculo resulta em uma dose equivalente de rato para o resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Informação Química
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Molecular Weight (MW)
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507.59
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Formula
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C29H29N7O2
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CAS No.
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1410880-22-6
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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100 mg/mL
heating
(197 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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Benzamide, 3-[[4-(dimethylamino)-1-oxo-2-buten-1-yl]amino]-N-[3-methyl-4-[[4-(3-pyridinyl)-2-pyrimidinyl]amino]phenyl]-
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Calculadora de molaridade Calculadora de diluição Calculadora de peso molecular
Grupo de Produto : MAPK > Inibidor JNK
