.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: 425,48 PF-04691502 é um PI3K competitivo ATP (α / β / δ / γ) / inibidor duplo de mTOR com Ki de 1,8 nM / 2,1 nM / 1,6 nM / 1,9 nM e 16 nM, pouca atividade contra Vps34, AKT, PDK1, p70S6K, MEK, ERK, p38 ou JNK. Fase 2. \ n PF-04691502 inibe potentemente PI3K classe I recombinante e mTOR em ensaios bioquímicos e suprime a transformação de fibroblastos aviários mediada por PI3K γ, δ ou PI3Kα mutante de tipo selvagem. Em linhas de células cancerosas mutantes PIK3CA e PTEN-deletadas, PF-04691502 reduz a fosforilação de AKT T308 e AKT S473 (IC (50) de 7,5-47 nM e 3,8-20 nM, respectivamente) e inibe a proliferação celular (IC (50) de 179-313 nM). PF-04691502 inibe a atividade de mTORC1 em células, conforme medido por ensaio estimulado por nutriente independente de PI3K, com um IC (50) de 32 nM e inibe a ativação de PI3K e mTOR efetores a jusante, incluindo AKT, FKHRL1, PRAS40, p70S6K, 4EBP1 e S6RP . A exposição de curto prazo a PF-04691502 inibe predominantemente PI3K, enquanto a inibição de mTOR persiste por 24 a 48 horas. PF-04691502 induz a parada do ciclo celular G (1), concomitante com a suprarregulação de p27 Kip1 e redução de Rb. \ n A atividade antitumoral de PF-04691502 é observada em U87 (PTEN nulo), SKOV3 (mutação PIK3CA) e xenoenxertos de carcinoma pulmonar de células não pequenas resistentes a gefitinibe e erlotinibe. PF-04691502 inibe o crescimento do tumor em 7 dias em 72%. A imagem FDG-PET revelou que PF-04691502 reduz o metabolismo da glicose dramaticamente. Os biomarcadores de tecido da atividade da via PI3K / mTOR, p-AKT (S473) e p-RPS6 (S240 / 244), também são dramaticamente inibidos após o tratamento com PF-04691502. \ n
Kinase Assay
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The fluorescence polarization assay for ATP competitive inhibition is done as follows: mPI3Kα dilution solution (90 nM) is prepared in fresh assay buffer (50 mM Hepes pH 7.4, 150 mM NaCl, 5 mM DTT, 0.05% CHAPS) and kept on ice. The enzyme reaction contains 0.5 nM mouse PI3Kα (p110α/p85α complex purified from insect cells), 30 μM PIP2, PF-04691502 (0, 1, 4, and 8 nM), 5 mM MgCl2, and 2-fold serial dilutions of ATP (0–800 μM). Final dimethyl sulfoxide is 2.5%. The reaction is initiated by the addition of ATP and terminated after 30 minutes with 10 mM EDTA. In a detection plate, 15 uL of detector/probe mixture containing 480 nM GST-Grp1PH domain and 12 nM TAMRA tagged fluorescent PIP3 in assay buffer is mixed with 15 uL of kinase reaction mixture. The plate is shaken for 3 minutes, and incubated for 35 to 40 minutes before reading on an LJL Analyst HT.
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Ensaio de células: [1]
Cell lines
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BT20, U87MG, and SKOV3 cells
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Concentrations
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0-3 mM
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Incubation Time
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3 days
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Method
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BT20, U87MG, and SKOV3 cells are plated at 3,000 cell/well in 96-well culture plates in growth medium with 10% FBS. Cells are incubated overnight and treated with DMSO (0.1% final) or serial diluted compound for 3 days. Resazurin is added to 0.1 mg/mL. Plates are incubated at 37 °C in 5% CO2 for 3 hours. Fluorescence signals are read as emission at 590 nm after excitation at 530 nm. IC50 values are calculated by plotting fluorescence intensity to drug concentration in nonlinear curve
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Estudo Animal: [2]
Animal Models
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LSL-KrasG12D heterozygous mice (B6.129-Kras tm4Tyj) and Ptendel mice (c;129S4-Pten tm1Hwu/J), Orthotopic transplant of ovarian tumors
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Formulation
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0.5% methylcellulose
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Dosages
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daily at either 7.5 or 10 mg/kg
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Administration
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Administered via oral gavage
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Conversão de diferentes modelos de animais com base em BSA (valor com base em dados das diretrizes preliminares da FDA)
Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
|
10
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3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
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Km factor
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20
|
20
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12
|
12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por exemplo, para modificar a dose de resveratrol usada para um camundongo (22,4 mg / kg) para uma dose baseada na BSA para um rato, multiplique 22,4 mg / kg pelo fator Km para um camundongo e, em seguida, divida pelo fator Km para um rato. Este cálculo resulta em uma dose equivalente de rato para o resveratrol de 11,2 mg / kg.
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Download de informações químicas PF-04691502 SDF
Molecular Weight (MW)
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425.48
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Formula
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C22H27N5O4
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CAS No.
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1013101-36-4
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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14 mg/mL
(32.9 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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2-amino-8-((1r,4r)-4-(2-hydroxyethoxy)cyclohexyl)-6-(6-methoxypyridin-3-yl)-4-methylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one
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Calculadora de molaridade Calculadora de diluição Calculadora de peso molecular
Grupo de Produto : PI3K / Akt / mTOR > Inibidor PI3K