PP121 1092788-83-4

.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 319,36 PP-121 é um inibidor multi-direcionado de PDGFR, Hck, mTOR, VEGFR2, Src e Abl com IC50 de 2 nM, 8 nM, 10 nM, 12 nM, 14 nM e 18 nM, também inibe DNA-PK com IC50 de 60 nM. \ n Atividade biológica A seletividade do PP-121 interage dentro de uma bolsa hidrofóbica que é conservada entre tirosina quinases e PI3Ks, não serina-treonina quinases. O PP-121 faz uma ligação de hidrogênio a Glu310 em Src, substituindo efetivamente o papel estrutural da lisina catalítica e resultando no ordenamento da hélice C e na estabilização de uma conformação ativa. PP-121 também inibe outras PI3Ks incluindo p110α e DNA-PK com IC50 de 52 nM e 60 nM, respectivamente. \ n O PP-121 bloqueia de forma potente e dependente da dose a fosforilação de Akt, p70S6K e S6 em duas linhas de células de glioblastoma, U87 e LN229. O PP-121 inibe potentemente a proliferação de um subconjunto das linhas de células tumorais por inibição direta de PI3Ks e mTOR. PP-121 induz uma parada G0 / G1 em células LN220, U87 e Seg1. O PP-121 também bloqueia a fosforilação da tirosina induzida por v-Src em células NIH3T3 transformadas com v-Src (Thr338). \ n PP-121 pode restaurar a coloração de fibra de estresse de actina em células NIH3T3 transformadas com v-Src (Thr338). PP-121 em uma baixa concentração de 40 nM inibe a autofosforilação de Ret em células de carcinoma tireoidiano TT que expressam o mutante Ret oncogênico C634W35. PP-121 inibe a proliferação celular com IC50 de 50 nM em células de carcinoma de tireóide TT. \ n PP-121 inibe a proliferação celular estimulada apenas com VEGF com IC50 de 41 nM em células endoteliais da veia umbilical humana (HUVECs). PP-121 inibe diretamente a fosforilação de tirosina induzida por Bcr-Abl, resultando em apoptose induzida por drogas em células K562 e uma combinação de apoptose e parada do ciclo celular em células BaF3 que expressam Bcr-Abl. Ensaios de quinase Os domínios de quinase purificados são incubados com PP-121 em diluições de 2 ou 4 vezes ao longo de uma faixa de concentração de 1 nM-50 µM ou com veículo (DMSO a 0,1%) na presença de ATP 10 µM, 2,5 µCi de γ-32P -ATP e substrato. As reações são terminadas por manchas nas membranas de nitrocelulose ou fosfocelulose, dependendo do substrato; esta membrana é então lavada 5–6 vezes para remover a radioatividade não ligada e seca. A radioatividade transferida é quantificada por imagem de fosforilação e os valores de IC50 são calculados ajustando os dados a uma resposta de dose sigmoidal usando o software Prism. \ N \ n Método Para análise de Western blot, as células são cultivadas em placas de 12 poços e tratadas com PP-121 no indicado concentrações ou veículo (0,1% DMSO). As células tratadas são lisadas, os lisados ​​são resolvidos por SDS-PAGE, transferidos para nitrocelulose e transferidos. Para os ensaios de proliferação celular, as células são cultivadas em placas de 96 poços e tratadas com PP-121 em diluições de 4 vezes (10 µM - 0,040 µM) ou veículo (0,1% DMSO). \ n Após 72 horas, as células são expostas ao sal de sódio de resazurina (22 µM) e a fluorescência é quantificada. Os valores IC50 são calculados usando o software Prism. Para ensaios de proliferação envolvendo contagem de células únicas, as células não aderentes são semeadas em baixa densidade (confluência de 3–5%) e tratadas com PP-121 (2,5 µM) ou veículo (DMSO 0,1%). As células são diluídas em azul de tripano diariamente e as células viáveis ​​contadas usando um hemocitômetro. \ n Para apoptose e análise do ciclo celular, as células são tratadas com a concentração indicada de PP-121 ou veículo (0,1% DMSO) por 24–72 horas. As células são coradas vivas com AnnexinV-FITC ou fixadas com etanol e coradas com iodeto de propídio. As populações de células são separadas usando um citômetro de fluxo FacsCalibur; os dados são coletados usando o software CellQuest Pro e analisados ​​com o software ModFit ou FlowJo.

Grupo de Produto : Proteína Tirosina Quinase > Inibidor PDGFR