.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} MNS (3,4-metil-enedioxi-β-nitrostreno) inibe completamente 2 μM U46619- (um tromboxano A2 mimetizador), 5 μM ADP-, 100 μM ácido araquidônico- (AA), 10 Agregação plaquetária induzida por colágeno μg / ml e 0,1 U / ml por trombina de maneira dependente da concentração com IC50 de 2,1 μM, 4,1 μM, 5,8 μM, 7,0 μM e 12,7 μM, respectivamente. O MNS inibe a agregação plaquetária causada pelo ionóforo de cálcio A23187 (1 μM) ou pelo ativador da proteína quinase C (PKC) PDBu (200 nM) com IC50 de 25,9 μM e 4,8 μM, respectivamente. O MNS (20 μM) diminui a expressão da P-selectina induzida pela dtrombina nas plaquetas para níveis comparáveis aos observados nas plaquetas tratadas com PGE1. MNS (20 μM) inibe marcadamente a fosforilação MARCKS induzida por trombina, mas não PDBu em plaquetas. MNS (20 μM) inibe marcadamente a fosforilação da proteína tirosina em 0,5 min ou 3 min após a estimulação de trombina ou colágeno nas plaquetas. MNS estimula UbG76V-GFP e degradação ODD-Luc com IC50 de 1,6 μM e 5,9 μM, respectivamente. MNS inibe o acúmulo induzido por MG132 do repórter com IC50 de 2,1 μM. O MNS inibe bactérias Gram-positivas (Staphylococcus aureus e Enterococcus faecalis) e Gram-negativas (Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa) com concentrações inibitórias mínimas (CIMs) de 128 mg / L. O MNS é muito mais potente do que a genisteína na inibição da agregação plaquetária e da fosforilação da proteína tirosina. O MNS (3,4-metilenodioxi-β-nitroestireno) é tão potente como inibidor da agregação plaquetária quanto o 3,4-dimetoxi-β-nitroestireno. MNS (20 μM) de forma dependente da concentração evita a liberação de ATP das plaquetas estimuladas por trombina ou colágeno. O MNS (20 μM) inibe a ligação do PAC-1 induzida pela trombina às plaquetas humanas. O grupo nitro do MNS (3,4-metilenodioxi-β-nitroestireno) é essencial para seu efeito antiplaquetário. \ n Protocolo (apenas para referência) Ensaio de cinase: [1]
|
Tyrosine Kinase Assay
|
For immune complex kinase assay, platelets treated with MNS, PP1, or piceatannol are lysed and immunoprecipitated with either anti-Src or anti-Syk antibody. In some experiments, recombinant human Src, Syk, FAK, or JAK2 is used and treated with MNS or tyrosine kinase inhibitors for 5 min. The activity of the immunoprecipitated kinases or the recombinant enzymes is determined by using a tyrosine kinase assay kit. Samples are incubated with biotinylated poly[Glu:Tyr] (4:1), an exogenous substrate, in kinase assay buffer (20 mM HEPES, 5 mM MgCl2, 5 mM MnCl2, 0.1 mM sodium orthovanadate, and 1 mM dithiothreitol) for 37℃ for 30 to 45 min. After stopping the enzyme reaction with EDTA (final concentration of 20 mM), both the phosphorylated and dephosphorylated substrates are immobilized by binding to the streptavidin-coated plate. The fraction of phosphorylated substrate is determined using a phosphotyrosine monoclonal antibody conjugated to HRP and an ensuing chromogenic substrate reaction.
|
Conversão de diferentes modelos de animais com base em BSA (valor com base em dados das diretrizes preliminares da FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Por exemplo, para modificar a dose de resveratrol usada para um camundongo (22,4 mg / kg) para uma dose baseada na BSA para um rato, multiplique 22,4 mg / kg pelo fator Km para um camundongo e, em seguida, divida pelo fator Km para um rato. Este cálculo resulta em uma dose equivalente de rato para o resveratrol de 11,2 mg / kg.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Informação Química
|
Molecular Weight (MW)
|
193.16
|
|
Formula
|
C9H7NO4
|
|
CAS No.
|
1485-00-3
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
N/A
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
39 mg/mL
(201.9 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
<1 mg/mL
(
|
|
|
Chemical Name
|
3,4-Methylenedioxy-β-nitrostyrene
|
\ n
Grupo de Produto : Ubiquitina > Inibidor de p97
