.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 572,34 Refametinib (RDEA119, Bay 86-9766) é um potente inibidor ATP não competitivo e altamente seletivo de MEK1 e MEK2 com IC50 de 19 nM e 47 nM, respectivamente. \ n A atividade biológica RDEA119 é seletivamente ligada diretamente a uma bolsa alostérica nas enzimas MEK1 / 2 e é altamente eficaz na inibição da proliferação celular em várias linhas de células tumorais, incluindo A375, SK-MEI-28, Colo205, HT-29 e BxPC3. RDEA119 inibe o crescimento dependente de ancoragem de linhas de células de câncer humano que abrigam o mutante de ganho de função V600E BRAF com valores de GI50 variando de 67 a 89 nM. Em condições independentes de ancoragem, os valores de GI50 para todas as linhas de células testadas são semelhantes (40-84 nM). RDEA119 mostra uma seletividade de tecido que reduz seu potencial para efeitos colaterais relacionados ao sistema nervoso central. RDEA119 inibe potentemente a proliferação das 4 linhas de células que abrigavam a mutação BRAF, mas não tem ou tem efeitos modestos nas outras 4 células que abrigavam o BRAF de tipo selvagem (IC50 de 0,034-0,217 μM vs. 1,413-34,120 μM). Este efeito inibitório de RDEA119 em linhas celulares selecionadas OCUT1 (BRAF V600E (+), PIK3CA H1047R (+)) e SW1376 (BRAF V600E (+)) é potencializado pela combinação com o inibidor de mTOR, temsirolimus. RDEA119 e temsirolimus também mostram efeitos sinérgicos na morte autofágica de células OCUT1 e KAT18 testadas seletivamente. A administração oral de RDEA119 a 50 mg / kg em um esquema de uma vez ao dia × 14 leva a uma inibição do crescimento do tumor de 68% (TGI) no modelo de tumor A375 de melanoma humano. A administração oral de RDEA119 a 25 mg / kg em um cronograma uma vez por dia × 14 leva a um TGI de 123% no modelo de tumor Colo205 de carcinoma de cólon humano (TGI> 100% ocorre quando o tumor encolhe abaixo de seu volume inicial). Uma dose de 25 mg / kg uma vez ao dia × 14 produz 56% e 67% de TGI para tumores HT-29 e A431, respectivamente. Ensaio de cinase de protocolo (apenas para referência): [1]
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MEK Kinase Assay
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Kinase inactive murine ERK2 (mERK2) K52A/T183A is affinity purified from Escherichia coli expressed using the pET21a vector. MEK1 kinase activity is determined using mERK2 K52A T183A as the substrate. Recombinant MEK1 enzyme (5 nM) is first activated by 0.02 unit or 1.5 nM of RAF1 in the presence of 25 mM HEPES (pH 7.8), 1 mM MgCl2, 50 mM NaCl, 0.2 mM EDTA, and 50 μM ATP for 30 minutes at 25 °C. The reactions are initiated by adding 2 μM of mERK2K52A T183A and 2.5 μCi [γ-33P] ATP in a total volume of 20 μL. The MEK2 kinase activity is determined similarly except that activation by RAF1 is not needed and 11 nM of MEK2 enzyme (active) are used in the assays.Kinase profiling is performed by Invitrogen using their Select Screen Kinase Profiling Service. The Z'-LYTE biochemical assay is used. RDEA119 is assayed in quadruplicate at 10 μM against 205 kinases.
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Ensaio de células: [1]
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Cell lines
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A375, SK-MEI-28, Colo205, HT-29 and BxPC3 cells
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Concentrations
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10-1000 nM
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Incubation Time
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48 hours
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Method
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For anchorage-dependent growth inhibition experiments, cells are plated in white 384-well plates at 1,000/20 μL/well or white 96-well microplates at 4,000/100 μL/well. After 24-h incubation at 37 °C, 5% CO2, and 100% humidity, RDEA119 is incubated for 48 hours at 37 °C and assayed using CellTiter-Glo. For the 96-well anchorage-independent growth assay, wells of an [ultralow binding" plate (Corning) are filled with 60 μL of a 0.15% agarose solution in complete RPMI 1640. Then, 60 μL of complete RPMI 1640 containing 9,000 cells in 0.15% agarose are added per well. After 24 hour, 60 μL of a 3 × drug solution in agarose-free complete RPMI 1640 are added. After 7 d, 36 μL of 6 × 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)- 2H-tetrazolium, inner salt reagent are added per well. After 2 hours at 37 °C, absorbance at 490 nm is determined on the M5 plate reader.
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Estudo Animal: [1]
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Animal Models
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Female athymic nude mice are injected s.c. with A375, HT-29 and A431 tumor; male athymic nude mice with Colo205 tumor.
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Formulation
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RDEA119 is dissolved in saline.
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Dosages
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25 or 50 mg/kg
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Administration
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Orally once daily for 14 days
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Conversão de diferentes modelos de animais com base em BSA (valor com base em dados das diretrizes preliminares da FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Por exemplo, para modificar a dose de resveratrol usada para um camundongo (22,4 mg / kg) para uma dose baseada na BSA para um rato, multiplique 22,4 mg / kg pelo fator Km para um camundongo e, em seguida, divida pelo fator Km para um rato. Este cálculo resulta em uma dose equivalente de rato para o resveratrol de 11,2 mg / kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Informação Química
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Molecular Weight (MW)
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572.34
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Formula
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C19H20F3IN2O5S
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CAS No.
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923032-37-5
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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BAY 869766
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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100 mg/mL
(174.72 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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100 mg/mL
(174.72 mM)
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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(S)-N-(3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-iodophenylamino)-6-methoxyphenyl)-1-(2,3-dihydroxypropyl)cyclopropane-1-sulfonamide
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Calculadora de molaridade Calculadora de diluição Calculadora de peso molecular
Grupo de Produto : MAPK > Inibidor MEK
