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Descrição do produto

.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Atividade biológicake A atividade bioquímica de G9a Dissociation Enhanced Lanthanide Fluoro-ImmunoAssays (DELFIA) são realizados em placas brancas opacas de 384 poços revestidas com Neutravidina. Os compostos de teste são diluídos para 12 μg / mL em Tris-HCl 50 mM pH 8,5 contendo 4% de DMSO e 10 μL são dispensados ​​nos poços. Os poços em branco e de controle receberam apenas tampão composto. GST-G9a a 10 μg / mL e SAM a 40 μM são diluídos em 50 mM Tris HCl pH 8,5 / 10 mM DTT e adicionados em um volume de 20 μL. Os poços em branco recebem apenas tampão Tris / DTT. As reações são iniciadas pela adição de 800 nM de substrato de H3 (1-20) -cisbiotina em 50 mM de Tris pH 8,5 em um volume de 10 μl e incubadas em temperatura ambiente por 60 minutos.ke As placas são lavadas 3 vezes com 100 μL de Tampão de Lavagem e 50 μL de Solução de Melhoramento são adicionados a cada poço. A fluorescência resolvida no tempo é medida após 45 minutos em uma imagem Viewlux Microplate Imager por 15 segundos com uma janela de 354 μs, atraso de 400 μs, excitação em 360 nm e emissão em 618 nm. \ n Células PANC-1 são semeadas e tratadas com BRD4770 em placas de 6 poços por 72 h. As células são tripsinizadas e testadas para a formação de colônias de ágar macio usando o Ensaio de Transformação Celular de 96 Poços CytoSelect, usando o corante CyQuant GR para medir os níveis de ácido nucleico celular total. A fluorescência é detectada com um leitor de placas Analyst HT usando um conjunto de filtros 485/520 nm.

Grupo de Produto : Epigenética > Inibidor de histona metiltransferase