MM-102 1417329-24-8

.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 669,8 MM-102 é um inibidor de MLL1 peptidomimético de alta afinidade com IC50 de 0,4 μM. \ n Ensaio de histona metiltransferase (HMT) In Vitro O ensaio HMT é realizado em 50 HEPES mM pH 7,8, NaCl 100 mM, EDTA 1,0 mM e glicerol 5% a 22 ° C. Cada reação contém 1,5 μCi do cofator, 3H-S-adenosilmetionina. O peptídeo H3 de 10 resíduos é usado como substrato a 50 μM. Os compostos são adicionados em concentrações que variam de 0,125 a 128 μM e incubados com o complexo pré-montado WDR5 / RbBP5 / ASH2L em uma concentração final de 0,5 μM para cada proteína por 2–5 min. As reações são iniciadas pela adição da proteína MLL1 a uma concentração final de 0,5 μM e podem prosseguir por 30 min antes de preparar a contagem de cintilação. Para contar as amostras, as reações são colocadas em quadrados separados de papel de filtro P81 e precipitadas por submersão em tampão bicarbonato de sódio 50 mM recém-preparado com pH 9,0. Após a lavagem e secagem, as amostras são agitadas em vórtice em fluido de cintilação Ultima Gold e contadas. Como um controle negativo, os ensaios são realizados usando 0,5 μM MLL1 / WDR5 / RbBP5 / complexo ASH2L montado com o mutante sem interação, WDR5D107A. Método \ n MV4; 11, células KOPN8 e K562 são cultivadas em meio RPMI 1640 (ATCC) suplementado com 10% de soro fetal bovino e 100 U / L de penicilina-estreptomicina e incubadas a 37 ° C sob 5% de CO2. As células são semeadas em placas de 12 poços para suspensão a uma densidade de 5 × 105 por poço (1 mL) e tratadas com controle de veículo (DMSO, 0,2%) ou MM-102 por 7 dias. O meio é trocado a cada 2 dias e os compostos são reabastecidos. O kit CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay é usado de acordo com as instruções do fabricante. Primeiro, 100 μL do reagente de ensaio são adicionados a cada poço, e o conteúdo é misturado por 2 min em um agitador orbital para induzir a lise celular. Após 10 minutos de incubação à temperatura ambiente, a luminescência é lida em um leitor de microplaca. \ n

Grupo de Produto : Epigenética > Inibidor de histona metiltransferase