CP-724714 537705-08-1

.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 469,53 CP-724,714 é um potente inibidor seletivo de HER2 / ErbB2 com IC50 de 10 nM, seletividade> 640 vezes contra EGFR, InsR, IRG-1R, PDGFR , VEGFR2, Abl, Src, c-Met etc. Fase 2. \ n Atividade biológica CP-724.714 é marcada seletivamente contra EGFR com IC50 de 6,4 μM. CP-724,714 é> 1.000 vezes menos potente para IR, IGF-1R, PDGFRβ, VGFR2, abl. Src, c-Met c-jun NH2-terminal quinase (JNK) -2, JNK-3, ZAP-70, quinase dependente de ciclina (CDK) -2 e CDK-5. CP-724,714 reduz potentemente a autofosforilação induzida por EGF da quimera contendo o domínio erbB2 quinase com IC50 de 32 nM, mas é marcadamente menos potente contra EGFR em células NIH3T3 transfectadas. CP-724.714 inibe sensivelmente a proliferação de células amplificadas com erbB2, incluindo BT-474 e SKBR3, com IC50 de 0,25 e 0,95 μM. CP-724.714 induz o acúmulo de células na fase G1 e uma redução acentuada na fase S em células BT-474 a 1 μM. CP-724.714 provavelmente exerce sua hepatotoxicidade por meio de lesão hepatocelular e mecanismos colestáticos hepatobiliares. CP-724.714 exibe inibição de efluxo de colil-lisilfluoresceína e taurocolato (TC) em canalículos em hepatócitos humanos criopreservados e cultivados a fresco, respectivamente. CP-724.714 inibe o transporte de TC em vesículas de membrana que expressam a bomba de exportação de sal biliar humano com IC50 de 16 μM e inibe o principal transportador de efluxo em canalículos biliares, MDR1, com IC50 de ~ 28 μM. CP-724.714 (25 mg / kg) é rapidamente absorvido após administração po e causa redução da fosforilação do receptor erbB2 do tumor após dosagem em xenoenxertos FRE-erbB2 ou BT-474. CP-724.714 induz apoptose em camundongos com xenoenxerto (sc) FRE-erbB2 e mostra 50% de inibição do crescimento tumoral a 50 mg / kg, sem perda de peso ou mortalidade. CP-724.714 também tem grande atividade antitumoral em xenoenxertos MDA-MB-453, MDA-MB-231, LoVo (cólon) e Colo-205 (cólon). Além disso, CP-724.714 (30 ou 100 mg / kg) reduz a quinase regulada por sinal extracelular e a fosforilação de Akt em xenoenxertos BT-474. \ n Ensaios de quinase Os domínios intracelulares erbB2 recombinantes (resíduos de aminoácidos 675-1255) e EGFR (resíduos de aminoácidos 668-1211) são expressos em células Sf9 infectadas com baculovírus como proteínas de fusão de glutationa S-transferase. As proteínas são purificadas por cromatografia de afinidade em esferas de glutationa sefarose para uso no ensaio. As placas de 96 poços Nunc MaxiSorp são revestidas por incubação durante a noite a 37 ° C com 100 μL / poço de 0,25 mg / mL de poli (Glu: Tyr, 4: 1), PGT em PBS. O excesso de PGT é removido por aspiração e a placa é lavada 3 vezes com tampão de lavagem (0,1% Tween 20 em PBS). A reação da quinase é realizada em 50 μL de HEPES de 50 mm (pH 7,4) contendo 125 mm de cloreto de sódio, 10 mm de cloreto de magnésio, 0,1 mm de ortovanadato de sódio, 1 mm de ATP e -15 ng de proteína recombinante. Inibidores em DMSO são adicionados; a concentração final de DMSO é 2,5%. A fosforilação é iniciada pela adição de ATP e prossegue durante 6 min à temperatura ambiente, com agitação constante. A reação da quinase é terminada por aspiração da mistura de reação e lavagem quatro vezes com tampão de lavagem. PGT fosforilado é medido após uma incubação de 25 min com 50 μL / poço de anticorpo antifosfotirosina PY54 conjugado com HRP, diluído para 0,2 μg / mL em tampão de bloqueio (3% BSA, 0,05% Tween 20 em PBS). O anticorpo é removido por aspiração e a placa é lavada quatro vezes com tampão de lavagem. O sinal colorimétrico é desenvolvido pela adição de 50 μL / poço de substrato de peroxidase de micropoços de tetrametilbenzidina e interrompido pela adição de 50 μL / poço de ácido sulfúrico 0,09 m. O produto fosfotirosina formado é estimado por medição da absorbância a 450 nm. O sinal para os controles é tipicamente A0.6-1.2, essencialmente sem fundo nos poços sem ATP, proteína quinase ou PGT, e é proporcional ao tempo de incubação por 6 min. \ n Método As células são semeadas em duplicata em 5 ~ 10 × 103 por poço em placas de 24 poços. No dia após o plaqueamento, CP-724.714 é adicionado titulando em seis ou mais diluições de 0,1 nM a 10 μM. Os poços de controle sem CP-724.714 também são semeados. As células são cultivadas durante 6 a 7 dias, altura em que as células sobreviventes são contadas. Após a tripsinização, as células são colocadas em solução de isótono e contadas imediatamente usando um contador de partículas Coulter Z2. A inibição do crescimento é calculada [(1 - valor experimental / valor de controle) × 100] para cada concentração. As curvas de dose-resposta são repetidas pelo menos duas vezes e são calculadas a média. Os valores IC50 são calculados usando o software Calcusyn.

Grupo de Produto : Proteína Tirosina Quinase > Inibidor HER2