CHIR-98014 252935-94-7

.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: 486,31 CHIR-98014 é um potente inibidor GSK-3α / β com IC50 de 0,65 nM / 0,58 nM, com a capacidade de distinguir GSK-3 de seus homólogos mais próximos Cdc2 e ERK2 . \ n CHIR-98014 inibe GSK-3β humano com Ki de 0,87 nM. CHIR-98014 é muito eficaz na prevenção de GSK-3 murino e de rato. Embora CHIR-98014 atue como um inibidor competitivo simples da ligação de ATP, ele exibe seletividade de 500 vezes a> 1000 vezes para GSK-3 contra 20 outras proteínas quinases incluindo Cdc2, ERK2, Tie-2 e KDR. CHIR-98014 impede Cdc2 com IC50 de 3,7 μM. No entanto, CHIR 98014 revela ptoência semelhante contra as isoformas ɑ e β altamente homólogas de GSK-3, é notável que discriminou fortemente entre GSK-3 e seus homólogos mais próximos CDC2 e ERK2. A exposição de células CHO-IR que expressam o receptor de insulina ou hepatócitos primários de rato a concentrações crescentes do inibidor CHIR98014 resulta em uma estimulação de duas a três vezes da razão de atividade GS acima do valor basal. As concentrações de CHIR-98014 que dão origem a metade da estimulação GS máxima (EC50) é de 106 nM e 107 nM para CHO-IR e hepatócitos de rato, respectivamente. \ n O inibidor de GSK-3 CHIR-98014 ativa a relação de atividade GS no músculo esquelético tipo I isolado de Zucker magro sensível à insulina e de ratos ZDF com resistência à insulina. O músculo sóleo isolado de ratos ZDF mostra resistência significativa à insulina para ativação de GS, mas respondeu a 500 nM de CHIR-98014 na mesma extensão (aumento de 40%) que o músculo de ratos Zucker magros. Notavelmente, a ativação de GS pela insulina mais CHIR-98014 é aditiva no músculo de ratos Zucker magros e maior do que aditiva no músculo de ratos ZDF. A atividade total de GS não é alterada por CHIR-98014 ou insulina nessas células e músculos. Enquanto isso, CHIR-98014 não influencia a resposta à dose de insulina no músculo de animais magros. A redução da hiperglicemia e a eliminação de glicose melhorada não se limitam a camundongos db / db e ratos ZDF, pois resultados semelhantes são observados com camundongos ob / ob, camundongos C57BL / 6 diabéticos induzidos por dieta e ratos SHHF intolerantes à glicose tratados com CHIR- 98014. Além disso, CHIR-98014 diminui a fosforilação (Ser396) da proteína tau no córtex e hipocampo de ratos pós-natais. \ n

Kinase assays

Polypropylene 96-well plates are filled with 300 μL/well buffer (50 mM tris HCl, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 1 mM dithiothreitol, 25 mM β-glycerophosphate, 1 mM NaF, 0.01% BSA, pH 7.5) containing kinase, peptide substrate, and any activators. CHIR-98014 or controls are added in 3.5 μL of DMSO, followed by 50 μL of ATP stock to yield a final concentration of 1 μM ATP in all cell-free assays. After incubation, triplicate 100-μL aliquots are transferred to Combiplate eight plates containing 100 μL/well 50 μM ATP and 20 mM EDTA. After 1 hour, the wells are rinsed five times with PBS, filled with 200 μL of scintillation fluid, sealed, left 30 min, and counted in a scintillation counter. All steps are performed at room temperature.

Ensaio de células: [1]

Cell lines	CHO-IR cells
Concentrations	0.01-10 μM
Incubation Time	30 min
Method	CHO-IR cells expressing human insulin receptor are grown to 80% confluence in Hamm`s F12 medium with 10% fetal bovine serum and without hypoxanthine. Trypsinized cells are seeded in 6-well plates at 1 × 106 cells/well in 2 mL of medium without fetal bovine serum. After 24 hours, medium is replaced with 1 mL of serum-free medium containing GSK-3 inhibitor CHIR 98014 or control (final DMSO concentration 0.1%) for 30 min at 37 °C. Cells are lysed by freeze/thaw in 50 mM tris (pH 7.8) containing 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 100 mM NaF, 1 mM phenylmethylsulfonyl fluoride, and 25 μg/mL leupeptin (buffer A) and centrifuged 15 min at 4 °C/14000 g. The activity ratio of GS is calculated as the GS activity in the absence of glucose-6-phosphate divided by the activity in the presence of 5 mM glucose-6-phosphate.

Estudo Animal: [1]

Animal Models	db/db mice with 8-9 weeks
Formulation	15% Captisol/citrate vehicle
Dosages	30 mg/kg
Administration	Subcutaneously

Conversão de diferentes modelos de animais com base em BSA (valor com base em dados das diretrizes preliminares da FDA)

Species	Baboon	Dog	Monkey	Rabbit	Guinea pig	Rat	Hamster	Mouse
Weight (kg)	12	10	3	1.8	0.4	0.15	0.08	0.02
Body Surface Area (m2)	0.6	0.5	0.24	0.15	0.05	0.025	0.02	0.007
Km factor	20	20	12	12	8	6	5	3

Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by	Animal B Km
	Animal A Km

Por exemplo, para modificar a dose de resveratrol usada para um camundongo (22,4 mg / kg) para uma dose baseada na BSA para um rato, multiplique 22,4 mg / kg pelo fator Km para um camundongo e, em seguida, divida pelo fator Km para um rato. Este cálculo resulta em uma dose equivalente de rato para o resveratrol de 11,2 mg / kg.

Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×	mouse Km(3)	= 11.2 mg/kg
	rat Km(6)

\ n Informação Química

Molecular Weight (MW)	486.31
Formula	C20H17Cl2N9O2
CAS No.	252935-94-7

Storage	3 years -20℃Powder
	6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
Synonyms

Solubility (25°C) *	In vitro	DMSO	4 mg/mL (8.22 mM)
		Water	<1 mg/mL (
		Ethanol	<1 mg/mL (
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Chemical Name	N2-(2-(4-(2,4-dichlorophenyl)-5-(1H-imidazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)ethyl)-5-nitropyridine-2,6-diamine

Calculadora de molaridade Calculadora de diluição Calculadora de peso molecular

Grupo de Produto : PI3K / Akt / mTOR > Inibidor GSK-3