Semagacestat (LY450139) 425386-60-3

.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 361,44 Semagacestat (LY450139) é um bloqueador de γ-secretase para Aβ42, Aβ40 e Aβ38 com IC50 de 10,9 nM, 12,1 nM e 12,0 nM, também inibe a sinalização Notch com IC50 de 14,1 nM. Fase 3. \ n Atividade biológica Semagacestat reduz a secreção de Aβ42, Aβ40 e Aβ38 de células de glioma humano H4 superexpressando de forma estável APP humana de tipo selvagem no meio de cultura, com IC50 de 10,9 nM, 12,1 nM e 12,0 nM, respectivamente, sem afetar viabilidade celular. Semagacestat também aumenta β-CTF em lisados ​​celulares com ECmax de 16,0 nM, e o aumento pode ser atenuado inesperadamente em altas concentrações. Semagacestat inibe a sinalização Notch com IC50 de 14,1 nM e mostra seletividade mínima de preservação de Notch com Notch IC50 / Aβ42 IC50 apenas 1,3. Semagacestat causa uma diminuição dependente da concentração em Aβ40 secretado no meio com IC50 de 111 nM de CTX murino que expressa APP murino endógeno, mas a formação de Aβ42 murino em CTX é aproximadamente 12 vezes menor do que Aβ40 de acordo com dados para neurônios de camundongos de tipo selvagem . A administração oral de Semagacestat (1 mg / kg) a camundongos Tg2576 transgênicos APP com 5,5 meses de idade melhora significativamente os déficits de memória na memória operacional espacial usando a tarefa do labirinto em Y, que desaparece após dosagem subcrônica de 8 dias. LY450139 diminui os níveis de hipocampo de Aβ42 e Aβ40 a 10 mg / kg (redução de 22-23%) e 30 mg / kg (redução de 36-41%) e aumenta β-CTF a 0,3-10 mg / kg de uma maneira dependente da dose sem inibição no processamento de outros substratos γ-secretase, como Notch, N-caderina ou EphA4, no cérebro, mas prejudica a cognição normal em camundongos do tipo selvagem e camundongos Tg2576 de 3 meses de idade, falhando em restaurar os déficits cognitivos em o teste do labirinto em Y. \ n Ensaio de processamento de APP celular e ensaio de sinalização Notch As células de glioma humano H4 com superexpressão estável de APP695 humano de tipo selvagem são tratadas com Semagacestat em várias concentrações por 24 horas. Os níveis de Aβ42, Aβ40 e Aβ38 na mídia são medidos usando kits de ELISA separados. O vetor de expressão da forma constitutivamente ativa de Notch (NotchΔE), codificando as bases 1-60 e 5193-6657 da região de codificação Notch1 humana (NM_017617), é construído em um vetor pcDNA3.1 com uma modificação de sequência de camundongo para humano. A atividade de sinalização Notch é avaliada usando o kit Cignal RBP-Jk Reporter Assay. A proteína RBP-Jk [CSL / CBF1 / Su (H) / Lag1] é um fator de transcrição ativado com o domínio intracelular Notch produzido pela γ-secretase. As células H4 são transitoriamente transfectadas com o vetor de expressão NotchΔE humano e a construção de luciferase responsiva a RBP-Jk usando Lipofectamine 2000 e, em seguida, expostas a várias concentrações de Semagacestat por 16 horas. A sinalização Notch é medida com base na atividade da luciferase no lisado celular usando o Dual-Glo Luciferase Assay System. \ n Método As células são incubadas com Semagacestat por 24 horas. Para a detecção de viabilidade celular, a porcentagem de células viáveis ​​é quantificada por sua capacidade de reduzir o brometo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difenil tetrazólio (MTT) após incubação com 0,5 mg / mL de MTT por 60 minutos. Para a detecção de espécies sAPP, as células são lisadas e analisadas por western blotting.

Grupo de Produto : Proteases > Inibidor de gama-secretase