TG101209 936091-14-4

.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 509.67 TG101209 é um inibidor JAK2 seletivo com IC50 de 6 nM, menos potente para Flt3 e RET com IC50 de 25 nM e 17 nM, ~ 30 vezes seletivo para JAK2 do que JAK3, sensível às mutações JAK2V617F e MPLW515L / K. \ n Atividade biológica TG101209 é uma pequena molécula oralmente biodisponível, inibidor competitivo de ATP para várias tirosina quinases. TG101209 inibe o crescimento de células Ba / F3 que expressam mutações JAK2V617F ou MPLW515L com um IC50 de B200 nM. Em uma linha celular de leucemia mieloide aguda que expressa JAK2V617F humana, TG101209 induz a parada do ciclo celular e apoptose e inibe a fosforilação de JAK2V617F, STAT5 e STAT3. TG101209 suprime o crescimento de colônias hematopoiéticas de células progenitoras primárias que abrigam mutações JAK2V617F ou MPL515. TG101209 reduz significativamente a fosforilação de STAT5 sem afetar a quantidade total de proteína STAT5. TG101209 inibe a survivina e reduz a fosforilação de STAT3 em células de câncer de pulmão HCC2429 e H460. TG101209 resulta em rádio-sensibilização de células de câncer de pulmão HCC2429 e H460 in vitro. Um estudo recente indica que TG101209 anula a fosforilação de BCR-JAK2 e STAT5, diminui a expressão de Bcl-xL e desencadeou a apoptose de células Ba / F3 transformadas. 100 mg / kg de TG101209 efetivamente prolonga a sobrevivência na doença induzida por JAK2V617F (10 dias). Em comparação com os animais tratados com placebo, os animais tratados com TG101209 exibem redução estatisticamente significativa, dependente da dose, na carga de células tumorais circulantes no dia +11 a 20%. \ n Ensaios de atividade de quinase livre de células Os valores de IC50 para TG101209 são determinados usando um ensaio de quinase baseado em luminescência com JAK2, VEGFR2 / KDR recombinante e JAK3 obtido de Upstate Cell Signaling Solutions. As reações de quinase são realizadas em um tampão que consiste em tampão Tris 40 mM (pH 7,4), MgCl2 50 mM, EGTA 800 M, Triton X-100 350 M, -mercaptoetanol 2 M, substrato de peptídeo 100 M e um apropriado quantidade de JAK2, VEGFR2 / KDR ou JAK3 de modo que o ensaio seja linear ao longo de 60 minutos. A reação é iniciada pela adição de 10L de ATP a uma concentração final de 3 mM e terminada pela adição do reagente Kinase-Glo após 60 minutos. A atividade da luciferase é quantificada usando um conjunto de instrumentos Ultra 384 para medições de luminosidade. Os valores IC50 são derivados de dados experimentais usando os recursos de ajuste de curva não linear do software GraphPad Prism 4.0. Os dados de inibição de concentração única para um painel de 63 quinases são determinados usando o serviço SelectScreen TM. \ n Método Em resumo, aproximadamente 2 × 103 células são semeadas em poços de placa de microtitulação em 100 ml de meio de crescimento RPMI-1640 com as concentrações indicadas de TG101209. O crescimento relativo das células é quantificado em intervalos de 24 horas usando o Cell Proliferation Kit II (XTT) de acordo com as orientações do fabricante. Após a incubação, 20 mL de XTT são adicionados aos poços e deixados para incubar por 4-6 horas. O produto formazan colorido é medido espectrofotometricamente a 450 nm com correção a 650 nm, e os valores IC50 são determinados usando o software GraphPad Prism 4.0. Os dados são submetidos a uma análise de ajuste de regressão não linear e os valores de IC50 são determinados como a concentração que inibiu a proliferação em 50%. Todas as experiências são feitas em triplicado e os resultados normalizados para o crescimento de células não tratadas.

Grupo de Produto : Proteína Tirosina Quinase > Inibidor FLT3