Pelitinibe (EKB-569) 257933-82-7

.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 467,92 Pelitinibe (EKB-569) é um potente inibidor irreversível de EGFR com IC50 de 38,5 nM. Fase 2. \ n Atividade biológica Pelitinibe exibe atividade inibitória muito maior contra EGFR, em comparação com o c-erbB-2 intimamente relacionado, bem como outras quinases como Src, Cdk4, c-Met, Raf e MEK / ERK, com IC50 variando de 282 nM para Src a> 20 μM para Cdk4. De forma consistente, o tratamento com Pelitinibe inibe significativamente a autofosforilação de EGFR, mas não c-Met em células A431. Pelitinib inibe potentemente a proliferação de queratinócitos humanos normais (NHEK), bem como células tumorais A431 e MDA-468 com IC50 de 61 nM, 125 nM e 260 nM, respectivamente, enquanto exibe pouca atividade contra células MCF-7 com IC50 de 3,6 μM. Pelitinib inibe a fosforilação de EGFR induzida por EGF em células A431 e NHEK com IC50 de 20-80 nM, bem como a fosforilação de STAT3 com IC50 de 30-70 nM. Pelitinibe a 75-500 nM também inibe especificamente a ativação de AKT e ERK1 / 2, sem afetar a via de NF-κB. Em células NHEK, Pelitinib também inibe potentemente a ativação de EGFR mediada por TGF-α com IC50 de 56 nM, bem como a ativação de STAT3 e ERK1 / 2 com IC50 de 60 nM e 62 nM, respectivamente. Uma dose oral única de 10 mg / kg de Pelitinibe inibe potentemente a fosforilação de EGFR em xenoenxertos A431 com EGFR superexpresso, em 90% em 1 hora e em> 50% após 24 horas. A administração de Pelitinibe a 20 mg / kg / dia inibe a tumorigênese em camundongos APCMin / + em 87%, equivalente ao efeito usado com 2 vezes as doses de EKI-785 (40 mg / kg / dia), consistente com maior potência in vivo . O pelitinibe inibe seletivamente a sinalização do EGFR nas células epiteliais das vias aéreas in vivo. No modelo de camundongo de remodelação epitelial das vias aéreas que é induzida por infecção viral e apresenta uma mudança retardada, mas permanente para metaplasia de células caliciformes, o tratamento com Pelitinibe a 20 mg / kg / dia corrige todos os 3 aspectos da remodelação epitelial, bloqueando completamente o aumento de células ciliadas células e diminuição das células de Clara, e inibindo significativamente a metaplasia das células caliciformes. Ensaio de cinase de protocolo (apenas para referência): [1]

Autophosphorylation of EGFR in cells

For experiments using cells in culture, A431 cells are treated with various concentrations of Pelitinib for 2.75 hours before co-incubation with 100 ng/mL EGF for 0.25 hour. Cells are washed twice with cold phosphate-buffered saline (PBS) before adding to lysis buffer (10 mM Tris, pH 7.5, 5 mM ethylenediamine tetra-acetic acid (EDTA), 150 mM NaCl, 1% Triton X-100, 1% Sodium deoxycolate, 0.1 % SDS, 1 mM PMSF, 10 mg/mL pepstatin A, 10 mg/mL leupeptin, 20 KIU/mL aprotinin, 2 mM sodium orthovanadate, and 100 mM sodium fluoride) for 20 minutes on ice, before immunoprecipitation and SDS-PAGE-immunoblotting. For immunoprecipitation, cultured cells are placed in cold lysis buffer and immediately homogenized on ice with a polytron with several pulses. The homogenate is first centrifuged at 2500 rpm (20 minutes, 4 °C) and then again at 14,000 rpm in a microcentrifuge (10 minutes, 4 °C). Supernatants (1000 μg protein) are incubated for 2 hours at 4 °C with 15 mL of EGFR polyclonal antibody. After 2 hours, 50 μL of protein G plus/protein A agarose beads is added and incubated with constant rotation for 2 hours at 4 °C. After washing with lysis buffer, beads are boiled for 2 minutes in Laemmli sample buffer. Proteins are then resolved by SDS-PAGE, transferred to immobilon membrane and probed overnight with an anti-phosphotyrosine antibody conjugated with horseradish peroxidase (HRP). Membranes are developed using the ECL reagent. Total EGFR protein is determined by stripping membranes and re-probing with receptor-specific antibodies. Quantitation of bands is done by densitometry, using ImageQuant software with a Molecular Dynamics laser transmittance scanner.

Ensaio de células: [2]

Cell lines	NHEK, A431, MCF-7, and MDA-468
Concentrations	Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM
Incubation Time	5 days
Method	Cells are seeded in 96-well dishes, and after 2 hours, Pelitinib is added and incubated for 5 days. After incubation, the medium is removed from each well and fresh medium (150 μL) + 1 mg/mL MTT solution (50 μL) is added. After incubation for 2 hours at 37 °C, the medium is replaced with 150 μL DMSO, and absorbance at 540 nm in each well is determined. The IC50 is calculated by linear regression of the data.

Estudo Animal: [1]

Animal Models	Athymic nu/nu female mice bearing subcutaneous A431 tumors, or APCMin/+ male mice, a murine model of human familial adenomatous polyposis (FAP)
Formulation	Dissolved in pH 2.0 water
Dosages	10, or 20 mg/kg/day
Administration	Oral gavage
Solubility	30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol, 30 mg/mL
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Conversão de diferentes modelos de animais com base em BSA (valor com base em dados das diretrizes preliminares da FDA)

Species	Baboon	Dog	Monkey	Rabbit	Guinea pig	Rat	Hamster	Mouse
Weight (kg)	12	10	3	1.8	0.4	0.15	0.08	0.02
Body Surface Area (m2)	0.6	0.5	0.24	0.15	0.05	0.025	0.02	0.007
Km factor	20	20	12	12	8	6	5	3

Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by	Animal B Km
	Animal A Km

Por exemplo, para modificar a dose de resveratrol usada para um camundongo (22,4 mg / kg) para uma dose baseada na BSA para um rato, multiplique 22,4 mg / kg pelo fator Km para um camundongo e, em seguida, divida pelo fator Km para um rato. Este cálculo resulta em uma dose equivalente de rato para o resveratrol de 11,2 mg / kg.

Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×	mouse Km(3)	= 11.2 mg/kg
	rat Km(6)

Informação Química

Molecular Weight (MW)	467.92
Formula	C24H23ClFN5O2
CAS No.	257933-82-7

Storage	3 years -20℃Powder
	6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
Synonyms

Solubility (25°C) *	In vitro	DMSO	13 mg/mL (27.78 mM)
		Water	<1 mg/mL (
		Ethanol	<1 mg/mL (
	In vivo	30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol	30 mg/mL
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Chemical Name	(E)-N-(4-(3-chloro-4-fluorophenylamino)-3-cyano-7-ethoxyquinolin-6-yl)-4-(dimethylamino)but-2-enamide

Calculadora de molaridade Calculadora de diluição Calculadora de peso molecular

Grupo de Produto : Proteína Tirosina Quinase > Inibidor EGFR