Foretinib (GSK1363089) 849217-64-7

.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 632,65 Foretinibe (GSK1363089) é um inibidor competitivo de ATP de HGFR e VEGFR, principalmente para Met e KDR com IC50 de 0,4 nM e 0,9 nM. Menos potente contra Ron, Flt-1/3/4, Kit, PDGFRα / β e Tie-2, e pouca atividade para FGFR1 e EGFR. Fase 2. \ n Atividade biológica XL880 inibe a família de receptores de HGF tirosina quinases com valores de IC50 de 0,4 nM para Met e 3 nM para Ron. XL880 também inibe KDR, Flt-1 e Flt-4 com valores de IC50 de 0,9 nM, 6,8 nM e 2,8 nM, respectivamente. XL880 inibe o crescimento de colônias de células B16F10, A549 e HT29 com IC50 de 40 nM, 29 nM e 165 nM, respectivamente. Um estudo recente indica que o XL880 afeta o crescimento celular de maneira diferente nas linhas de células de câncer gástrico MKN-45 e KATO-III. XL880 inibe a fosforilação de MET e moléculas de sinalização a jusante em células MKN-45, enquanto visa GFGR2 em células KATO-III. Uma dose única de 100 mg / kg de gavagem oral de XL880 resulta na inibição substancial da fosforilação de Met tumor B16F10 e ligante (por exemplo, HGF ou VEGF) -induzida a fosforilação do receptor de Met no fígado e Flk-1 / KDR no pulmão, os quais persistiram até 24 horas. O tratamento com XL880 (30-100 mg / kg, uma vez ao dia, gavagem oral) resulta na redução da carga tumoral. A carga do tumor na superfície do pulmão é reduzida em 50% e 58% após o tratamento com 30 e 100 mg / kg XL880, respectivamente. O tratamento com XL880 de camundongos com tumores sólidos B16F10 também resulta na inibição do crescimento tumoral dependente da dose de 64% e 87% a 30 e 100 mg / kg, respectivamente. Para ambos os estudos, a administração de XL880 é bem tolerada sem perda significativa de peso corporal. XL880 foi desenvolvido para direcionar a sinalização anormal de HGF por meio de Met e simultaneamente direcionar vários receptores tirosina quinase envolvidos na angiogênese tumoral. XL880 causou hemorragia tumoral e necrose em xenoenxertos humanos dentro de 2 a 4 horas, e tumornecrose máxima é observada em 96 horas (após cinco doses diárias), resultando em regressão completa. Ensaio de inibição de quinase A inibição de quinase é investigada usando um dos três formatos de ensaio: transferência de [33P] fosforil, quimioluminescência acoplada a luciferase ou tecnologia de tirosina quinase AlphaScreen. IC50s são calculados por análise de regressão não linear usando XLFit.33P-Phosphoryl Transfer Kinase Assay. As reações são realizadas em 384 poços brancos, fundo transparente, placas de microtitulação de alta ligação (Greiner, Monroe, NC). As placas são revestidas com 2 μg / poço de proteína ou substrato de peptídeo em um volume de 50 μL de tampão de revestimento contendo 40 μg / mL de substrato (poli (Glu, Tyr) 4: 1, 22,5 mM Na2CO3, 27,5 mM NaHCO3, 50 mM NaCl e 3 mM NaN 3. As placas revestidas são lavadas uma vez com 50 μL de tampão de ensaio após incubação durante a noite à temperatura ambiente (RT). Os compostos de teste e as enzimas são combinados com 33P-γ-ATP (3,3 μCi / nmol) em um volume total de 20 μL. A mistura de reação é incubada à temperatura ambiente por 2 horas e terminada por aspiração. As placas de microtitulação são subsequentemente lavadas 6 vezes com 0,05% de tampão Tween-PBS (PBST). Fluido de cintilação (50 μL / poço) é adicionado e 33P incorporado é medido por espectrometria de cintilação líquida usando um contador de cintilação MicroBeta. As reações de ensaio de quimioluminescência acoplada a luciferase são conduzidas em placas de microtitulação de ligação média brancas de 384 poços (Greiner). Em uma primeira etapa, a enzima e o composto são combinados e incubados por 60 minutos; as reações são iniciado pela adição de ATP e d substrato de peptídeo (poli (Glu, Tyr) 4: 1) em um voume final de 20 μL e incubado à temperatura ambiente por 2-4 horas. Após a reação da quinase, uma alíquota de 20 μL de Kinase Glo (Promega, Madison, WI) é adicionada e o sinal de luminescência é medido usando um leitor de placas Victor. O consumo total de ATP é limitado a 50%. AlphaScreenTM Ensaio de tirosina quinase Esferas doadoras revestidas com estreptavidina e esferas aceitadoras revestidas com anticorpo anti-fosfotirosina PY100 são usadas. Utiliza-se poli (Glu, Tyr) 4: 1 biotinilado como substrato. A fosforilação do substrato é medida pela adição de grânulos doador / aceitador por luminescência após a formação do complexo de grânulos doador-aceitador. Quinase e compostos de teste são combinados e pré-incubados por 60 minutos, seguido pela adição de ATP e poli (Glu, Tyr) biotinilado em um volume total de 20 μL em 384 poços brancos, placas de microtitulação de ligação média (Greiner). As misturas de reação são incubadas durante 1 hora à temperatura ambiente. As reações são extintas pela adição de 10 μL de suspensão de esferas AlphaScreen 15-30 μg / mL contendo Hepes 75 mM, pH 7,4, NaCl 300 mM, EDTA 120 mM, BSA 0,3% e Tween-20 0,03%. Após 2-16 horas de incubação à temperatura ambiente, as placas são lidas usando um leitor AlphaQuest. Método \ n Células B16F10, A549 e HT29 (1,2 × 103 por poço) são misturadas com ágar mole e semeadas em uma placa de 96 poços contendo 10% de FBS e EXEL-2880 sobre uma camada de ágar base. Para condições de normóxia, as placas são incubadas (37 ° C) por 12 a 14 dias em 21% de oxigênio, 5% de CO2 e 74% de nitrogênio, enquanto a incubação (37 ° C) em condições de hipóxia é feita em uma câmara de hipóxia em 1 % de oxigênio, 5% de CO2 e 94% de nitrogênio. O número de colônias é avaliado em cada condição após a adição de 50% de Alamar Blue e detecção de fluorescência. \ n

Grupo de Produto : Proteína Tirosina Quinase > Inibidor c-Met