CYC116 693228-63-6

.cp_wz table {border-top: 1px solid #ccc; border-left: 1px solid #ccc; } .cp_wz table td {border-right: 1px solid #ccc; borda inferior: 1px sólido #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz tabela th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; preenchimento: 5px 0px 0px 5px;} \ n Peso molecular: \ n 368,46 CYC116 é um inibidor potente de Aurora A / B com Ki de 8,0 nM / 9,2 nM, é menos potente para VEGFR2 (Ki de 44 nM), com 50- potência vezes maior do que CDKs, não ativo contra PKA, Akt / PKB, PKC, nenhum efeito em GSK-3α / β, CK2, Plk1 e SAPK2A. Fase 1. \ n Atividade biológica O CYC116 mais seletivo para Aurora mostra um efeito inibitório nas quinases Aurora A e B 50 vezes mais potentes do que qualquer um dos CDKs testados. O CYC116 é inicialmente rastreado contra um painel de leucemia humana e linhas de células tumorais sólidas usando um ensaio antiproliferativo MTT. Os resultados mostram que CYC116 tem atividade antitumoral de amplo espectro e apresenta citotoxicidade específica contra a linha celular MV4-11 de leucemia mielóide aguda com IC50 de 34 nM. Além disso, a atividade antiproliferativa de CYC116 está associada à modulação de Aurora A e B, como inibição da autofosforilação de Aurora, redução da fosforilação de histona H3, poliploidia, seguida de morte celular, resultante de uma falha na citocinese. Camundongos com xenoenxertos subcutâneos de NCI-H460 recebem CYC116 por via oral por 5 dias, em níveis de dose de 75 e 100 mg / kg qd. Isso leva a atrasos no crescimento do tumor de 2,3 e 5,8 dias, o que se traduz em atrasos de crescimento específicos de 0,32 e 0,81, respectivamente . \ n Ensaios de quinase Os ensaios de Aurora A quinase são realizados usando um volume de reação de 25 μL (25 mM β-glicerofosfato, 20 mM de Tris / HCl, pH 7,5, 5 mM de EGTA, 1 mM de DTT, 1 mM de Na3VO4, 10 μg de kemptide (peptídeo substrato)). A cinase Aurora A recombinante é diluída em Tris / HCl 20 mM, pH 8, contendo 0,5 mg / mL de BSA, glicerol 2,5% e Brij-35 0,006%. As reações são iniciadas pela adição de 5 μL de mistura de Mg / ATP (15 mM de MgCl2, 100 μM de ATP, com 18,5 kBq γ-32P-ATP por poço) e incubadas a 30 ° C por 30 minutos antes do término com 25 μL de 75 mM H3PO4. Os ensaios de cinase Aurora B são realizados como Aurora A, exceto que antes do uso, Aurora B é ativada em uma reação separada a 30 ° C por 60 minutos com proteína centrômero interna. Método \ n Ensaios MTT padrão são realizados. Em suma, as células são semeadas em placas de 96 poços de acordo com o tempo de duplicação e incubadas durante a noite a 37 ° C. Os compostos de teste são feitos em DMSO, uma série de diluição de 3 vezes é preparada em 100 μL de meio de célula, adicionado às células (em triplicado) e incubado por 72 ou 96 horas a 37 ° C. O MTT é feito como um estoque de 5 mg / mL em meio celular e a solução é esterilizada por filtração. O meio é removido das células seguido por uma lavagem com PBS. A solução de MTT é então adicionada a 20 μL / poço e incubada no escuro a 37 ° C por 4 horas. A solução de MTT é removida e as células são novamente lavadas com 200 μL de PBS. O corante MTT é solubilizado com 200 μL / poço de DMSO por agitação. A absorvância é lida a 540 nm e os dados analisados ​​usando software de ajuste de curva para determinar os valores de IC50. \ n

Grupo de Produto : Epigenética > Aurora Inibidor de Cinase