PF-06463922

A atividade biológica PF-06463922 demonstra atividade celular significativa contra ALK e um grande conjunto de mutações clínicas de ALK com IC50 variando de 0,2 nM-77 nM. [1] PF-06463922 inibe significativamente a proliferação celular e induz a apoptose celular nas células NSCLC humanas HCC78 que abrigam as fusões SLC34A2-ROS1 e as células BaF3-CD74-ROS1 que expressam CD74-ROS1 humano. PF-06463922 também mostra uma potente atividade inibidora do crescimento e induz apoptose nas células NSCLC que possuem fusões ALK não mutantes ou ALK mutantes. Em ratos, PF-06463922 apresenta baixa depuração plasmática, volume de distribuição moderado, meia-vida razoável, baixa propensão para efluxo mediado pela glicoproteína-p 1 e biodisponibilidade de 100%. In vivo, PF-06463922 mostra eficácia antitumoral citorredutora nos modelos de xenoenxerto NIH3T3 que expressam CD74-ROS1 humano e Fig-ROS1 via inibição na fosforilação de ROS1 e as moléculas de sinalização a jusante, bem como a inibição da proteína do ciclo celular Ciclina D1 em tumores. In vivo, PF-06463922 também demonstra atividade antitumoral marcada em camundongos com xenoenxertos de tumor que expressam EML4-ALK, EML4-ALK-L1196M, EML4-ALK-G1269A, EML4-ALK-G1202R ou NPM-ALK. \ n Ensaios bioquímicos de quinase As proteínas de domínio da quinase ALK mutante e selvagem humana recombinante (aminoácidos 1093-1411) são produzidas internamente usando a expressão baculoviral, pré-ativadas por meio de autofosforilação com MgATP e testadas para a atividade da quinase usando um ensaio de mudança de mobilidade microfluídica. As reações continham 1,3 nM de ALK de tipo selvagem ou 0,5 nM de ALK mutante (apropriado para produzir 15-20% de fosforilação do substrato peptídico após 1 h de reação), 3 μM 5-FAM-KKSRGDYMTMQIG-CONH2), 5 mM de MgCl2 e o Nível Km de ATP em Hepes 25 mM, pH 7,1. \ n Os inibidores demonstraram ser competitivos em ATP a partir de estudos cinéticos e cristalográficos. Os valores de Ki são calculados ajustando a conversão (%) a uma equação de inibição competitiva. A enzima ROS1 é testada como descrito acima para ALK, exceto usando 0,25 nM de domínio catalítico ROS1 humano recombinante (aminoácidos 1883-2347). A seletividade do inibidor de quinase é avaliada usando um painel de 206 quinase.

Grupo de Produto : Proteína Tirosina Quinase > Inibidor ALK